Efeito da magnetização do diluente de resfriamento na conservação do sêmen de garanhões da raça Mangalarga Marchador
DOI:
https://doi.org/10.5281/zenodo.22682808Palavras-chave:
campo magnético, motilidade espermática, refrigeração seminal, reprodução equinaResumo
Com o crescimento da equideocultura ao longo dos anos, surgiram novas biotécnicas para a reprodução animal, maximizando a eficiência produtiva e reprodutiva desses animais. Estudos anteriores sugerem que a aplicação de campo magnético na criopreservação de sêmen pode reduzir os danos causados pelo processo de resfriamento e criopreservação, contribuindo para a manutenção da qualidade espermática. Este estudo propõe comparar as características reprodutivas e a viabilidade do sêmen de garanhões da raça Mangalarga Marchador diluído e refrigerado a 5ºC submetido a um campo magnético, avaliando a qualidade do sêmen por meio do software CASA (AndroVision ® - Minitube), considerando-se a motilidade total e a motilidade progressiva. O delineamento experimental é composto por um grupo controle, com diluente BotuSêmen® convencional, e por um grupo experimental, com diluente BotuSêmen® magnetizado, utilizando diluente previamente submetido a um campo magnético de 4000 Gauss por pelo menos 24h, resfriados em caixas de isopor específicas para tal finalidade (BotuFlex®) a 5°C para a análise 24 horas e 48 horas após o resfriamento. Foram realizadas cinco coletas de seis garanhões da raça Mangalarga Marchador, com idades de 5 a 10 anos, com vagina artificial modelo Botucatu®. As amostras coletadas com cerca de 20mL foram submetidas aos respectivos resfriamentos e analisadas posteriormente. A análise estatística foi realizada no software R e conduzida em esquema fatorial 2³, composto por três fatores com dois níveis cada: hora de avaliação (24 e 48 h), minuto de avaliação (0 e 3 min) e tratamento (controle e magnético), totalizando oito combinações experimentais, nas quais os resultados foram apresentados como média ± erro-padrão da média e as médias foram comparadas ao nível de 5% de probabilidade quando necessário. O único fator que apresentou diferença significativa aos testes de motilidade total e progressiva foi a “hora”, não havendo diferença significativa relativos aos demais fatores.
Referências
ABDELSALAM, H.; MOSTAFA, H.; EL-ANSARY, M.; AWAD, M.; SULTAN, W. Magnetization treatment effect on some physical and biological characteristics of saline irrigation water. Scientific Reports, v. 15, artigo 19803, 2025. Disponível em: https://doi.org/10.1038/s41598-025-04297-6. Acesso em: 9 nov. 2025.
AIDAR, N. B. Criopreservação de sêmen equino. 2013. Monografia (Bacharelado em Medicina Veterinária) – Universidade de Brasília – Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Brasília, 2013.
ALASHRAM, K. M. et al. A irrigação com água salina magnetizada melhora as propriedades químicas e hidráulicas do solo: um estudo em coluna de solo. Water, v. 14, n. 24, p. 4048, 2022. Disponível em: https://doi.org/10.3390/w14244048. Acesso em: 10 nov. 2025.
ALI HAMEED, E. The effect of magnetic field on the physicochemical properties of aqueous solutions. IAR Journal of Agriculture Research and Life Sciences, v. 6, n. 1, p. 1–7, jan. 2025. Disponível em: https://doi.org/10.47310/iarjals.2025.v06i01.001. Acesso em: 9 nov. 2025.
AL-KASS, Z.; MORRELL, J. M. Freezing stallion semen—What do we need to focus on for the future? Veterinary Sciences, v. 11, n. 2, p. 65, 2024. Disponível em: https://doi.org/10.3390/vetsci11020065. Acesso em: 9 nov. 2025.
ALVARENGA, M. A.; PAPA, F. O.; RAMIRES NETO, C. Advances in stallion semen cryopreservation. Veterinary Clinics of North America: Equine Practice, v. 32, p. 521–530, 2016. Disponível em: https://doi.org/10.1016/j.cveq.2016.08.003. Acesso em: 10 nov. 2025.
AMIRI, M. C.; DADKHAH, Ali A. On reduction in the surface tension of water due to magnetic treatment. Colloids and Surfaces A: Physicochemical and Engineering Aspects, v. 278, n. 1–3, p. 252–255, 2006. Disponível em: https://doi.org/10.1016/j.colsurfa.2005.12.046. Acesso em: 10 nov. 2025.
ARRUDA, R. P. Avaliação dos efeitos de diluidores e crioprotetores para o espermatozoide eqüino pelo uso de microscopia de epifluorescência, citometria de fluxo, análises computadorizadas da motilidade (CASA) e da morfometria (ASMA). 2000. 121 f. Tese (Livre Docência) - Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade de São Paulo, São Paulo, 2000
ASKARIANZADEH, Z.; SHARAFI, M.; TORSHIZI, M. A. K. Sperm quality characteristics and fertilization capacity after cryopreservation of rooster semen in extender exposed to a magnetic field. Animal Reproduction Science, [S.l.], v. 198, p. 37–46, 2018. Disponível em: https://doi.org/10.1016/j.anireprosci.2018.08.043. Acesso em: 9 nov. 2025.
BERTOLDO, M. J.; GUIBERT, E.; TARTARIN, P.; GUILLORY, V.; FROMENT, P. Effect of metformin on the fertilizing ability of mouse spermatozoa. Cryobiology, v. 68, p. 262–268, 2014. Disponível em: https://doi.org/10.1016/j.cryobiol.2014.02.006. Acesso em: 9 nov. 2025.
CANISSO, I. F.; SOUZA, F. A.; SILVA, E. C. da; CARVALHO, G. R.; GUIMARÃES, J. D.; LIMA, A. L.. Inseminação artificial em equinos: sêmen fresco, diluído, resfriado e transportado. Revista Acadêmica: Ciências Agrárias e Ambientais, Curitiba, v. 6, n. 3, p. 389–398, jul./set. 2008. Disponível em: https://doi.org/10.7213/cienciaanimal.v6i3.10622. Acesso em: 10 nov. 2025.
CARVALHO, C. P. T.; LANÇONI, R.; SANTOS, G. C.; BERBER, R. C. A. Principais avanços das biotecnologias usadas na inseminação artificial de equinos: uma revisão. Scientific Electronic Archives, v. 8, n. 3, Mato Grosso, out. 2015.
CECIL, H. C.; BAKST, M. R. In vitro lipid peroxidation of turkey spermatozoa. Poultry Science, v. 72, n. 7, p. 1370–1378, 1993. Disponível em: https://doi.org/10.3382/ps.0721370. Acesso em: 10 nov. 2025.
CEROLINI, S.; KELSO, K. A.; NOBLE, R. C.; SPEAKE, B. K.; PIZZI, F.; CAVALCHINI, L. G. Relationship between spermatozoan lipid composition and fertility during aging of chickens. Biology of Reproduction, v. 57, n. 5, p. 976–980, 1997. Disponível em: https://doi.org/10.1095/biolreprod57.5.976. Acesso em: 10 nov. 2025.
CHAVEIRO, A.; MACHADO, L.; FRIJTERS, A.; ENGEL, B.; WOELDERS, H. Improvement of parameters of freezing medium and freezing protocols for bull sperm using two osmotic supports. Theriogenology, v. 65, p. 1875–1890, 2006. Disponível em: https://doi.org/10.1016/j.theriogenology.2005.10.017. Acesso em: 10 nov. 2025.
COELHO, R. W. de A.; DIAS, J. C. O. Freezing equine semen after 24 hours of cooling. Research, Society and Development, [S. l.], v. 10, n. 1, p. e1831019939, 2021. Disponível em: https://doi.org/10.33448/rsd-v10i1.9939. Acesso em: 8 nov. 2025.
CONDE, D. C.; SOUZA, G. V. de; ALMEIDA FILHO, P. R. de O.; SHIMODA, E.; SILVA, J. F. S. Características seminais de dois diluentes de simples preparação e acessibilidade de seus componentes para o resfriamento de ejaculado equino. Brazilian Journal of Development, [S. l.], v. 11, n. 6, p. e80541, 2025. Disponível em: https://doi.org/10.34117/bjdv11n6-064. Acesso em: 10 nov. 2025.
DELL’AQUA JUNIOR, J. A. Efeito de centrifugação, tipos de envase e temperatura de congelamento sobre parâmetros espermáticos e índices de fertilidade relacionados com o local da deposição e concentração da dose inseminante do sêmen congelado equino. Dissertação (Mestrado em Medicina Veterinária – Área de Reprodução Animal) – Botucatu-SP, Universidade Estadual Paulista UNESP-Campus Botucatu, 81p. 2002.
DONG, R.; LUO, L.; LIU, X.; YU, G. Effects of riboflavin on boar sperm motility, sperm quality, enzyme activity and antioxidant status during cryopreservation. Veterinary Medicine and Science, v. 8, p. 1509–1518, 2022. Disponível em: https://doi.org/10.1002/vms3.833. Acesso em: 9 nov. 2025.
EL-SPEIY, M. E.; EL-SAWY, M. A.; EL-SAID AHMED, H.; KAMEL, K. I. Impact of magnetic extender on semen quality, oxidative stress, bacterial count and fertilizing ability in rabbits. Egyptian Journal of Rabbit Science, v. 27, n. 1, p. 109–129, 2017.
FERREIRA, H. N. et al. Variable inter-assay estimation of sperm DNA fragmentation in stallions classified as good and bad semen freezers. CryoLetters, v. 39, n. 1, p. 67–71, 2018.
FERREIRA-SILVA, J. C.; BASTO, S. R. L.; MOURA, M. T.; ROCHA, J. M.; FREITAS NETO, L. M.; SANTOS FILHO, J. P.; SILVA FILHO, M. L.; OLIVEIRA, M. A. L. Freezing of stallion semen: in vitro evaluation of motility and acrosin activity in sperm cells cryopreserved using different semen extenders. Biopreservation and Biobanking, v. 16, n. 6, p. 439–443, 2018. Disponível em: https://doi.org/10.1089/bio.2018.0022. Acesso em: 8 nov. 2025.
FONSECA, E. L. Criopreservação do sêmen equino. 2023. Monografia (Bacharelado em Medicina Veterinária) – Centro Universitário Brasileiro – UNIBRA, Recife, 2023.
FÜRST, R.; CARVALHO, G. R.; FÜRST, M. C. O.; RUAS, J. R. M.; BORGES, A. M.; MAFILLI, V. Efeito do resfriamento do sêmen equino sobre sua congelabilidade. Arquivos Brasileiros de Medicina Veterinária e Zootecnia, v. 57, n. 5, p. 599–607, 2005. Disponível em: https://doi.org/10.1590/S0102-09352005000500005. Acesso em: 9 nov. 2025.
GENEROSO, T. N. Efeito da magnetização nas características da água e nos parâmetros de transporte de fósforo no solo. 2016. Dissertação (Pós-graduação em Engenharia Agrícola) – Universidade Federal de Viçosa, Viçosa, 2016.
GRAHAM, J. K. Cryopreservation of stallion spermatozoa. Veterinary Clinics of North America: Equine Practice, v. 12, n. 1, p. 131–147, 1996.
GUO, H.-T.; WANG, J.-R.; SUN, L.-Z.; JIN, X.-H.; SHI, X.-Y.; LIN, J.-Y.; YUE, S.-L.; ZHOU, J.-B. Effects of astaxanthin on plasma membrane function and fertility of boar sperm during cryopreservation. Theriogenology, v. 164, p. 58–64, 2021. Disponível em: https://doi.org/10.1016/j.theriogenology.2021.01.007. Acesso em: 9 nov. 2025.
HERMSDORFF, G. E. Inseminação artificial. Boletim da Sociedade Brasileira de Medicina Veterinária, [S.l.], v. 1, p. 21-55, 1940.
HORE, P. J. Are biochemical reactions affected by weak magnetic fields?. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, v. 109, p. 1357, 2012. Disponível em: https://doi.org/10.1073/pnas.1120531109. Acesso em: 9 nov. 2025.
HOSSEINI, H.; HOSSEINI, H.; JALILI, M.; NOROUZI APOURVARI, S.; SCHAFFIE, M.; RANJBAR, M. Static adsorption and interfacial tension of sodium dodecyl sulfate via magnetic field application. Journal of Petroleum Science and Engineering, v. 178, p. 205–215, 2019. Disponível em: https://doi.org/10.1016/j.petrol.2019.03.040. Acesso em: 10 nov. 2025.
JHA, P.; XANTHAKIS, E.; JURY, V.; LE-BAIL, A. An overview on magnetic field and electric field interactions with ice crystallisation; application in the case of frozen food. Crystals, v. 7, p. 299, 2017. Disponível em: https://doi.org/10.3390/cryst7100299. Acesso em: 9 nov. 2025.
JHAMB, D.; TALLURI, T. R.; SHARMA, S.; JUNEJA, R.; NIRWAN, S. S.; YADAV, D.; PARGI, K. K.; TANWAR, A.; KUMAR, P.; KUMAR, R.; MEHTA, S. C.; PARASHAR, M.; GAUR, M. Freezability and fertility rates of stallion semen supplemented with trehalose in lactose extender. Journal of Equine Veterinary Science, v. 126, p. 104293, 2023. Disponível em: https://doi.org/10.1016/j.jevs.2023.104293. Acesso em: 8 nov. 2025.
KADIVAR, A.; ESFANDABADI, N. S.; NAZHVANI, E. D.; SHIRAZI, A.; AHMADI, E. Effects of cryopreservation on stallion sperm protamine messenger RNAs. Reproduction in Domestic Animals, v. 55, n. 3, p. 274–282, 2019. Disponível em: https://doi.org/10.1111/rda.13615. Acesso em: 8 nov. 2025.
KANG, T.; LEE, D.; KO, Y.; JUN, S. Effects of pulsed electric field (PEF) and oscillating magnetic field (OMF) on supercooling preservation of beef at different fat levels. International Journal of Refrigeration, v. 136, p. 36–45, 2022. Disponível em: https://doi.org/10.1016/j.ijrefrig.2022.01.004. Acesso em: 9 nov. 2025.
KATILA, T. Procedures for handling fresh stallion semen. Theriogenology, v. 48, n. 7, p. 1217- 1227, 1997.
KOWALCZYK, A.; CZERNIAWSKA, P.I.Ą.; TKOWSKA, E.; KUCZAJ, M. Factors influencing the popularity of artificial insemination of mares in Europe. Animals, v. 9, p. 460, 2019. Disponível em: https://doi.org/10.3390/ani9070460. Acesso em: 10 nov. 2025.
LEE, S.; KIM, Y.-M.; CHEONG, H.-T.; PARK, C.-K.; LEE, S.-H. Effect of magnetized freezing extender on membrane damages, motility, and fertility of boar sperm following cryopreservation. Animals, v. 13, p. 634, 2023. Disponível em: https://doi.org/10.3390/ani13040634. Acesso em: 9 nov. 2025.
LEFRAPPER, L.; WALSTON, L.; WHISNANT, C.S. Comparison of various extenders for storage of cooled stallion spermatozoa for 72 hours. Journal of Equine Veterinary Science, v. 30, p. 200-4, 2010. Disponível em: https://doi.org/10.1016/J.JEVS.2010.02.007. Acesso em: 10 nov. 2025
LI, R.; GUO, M.; LIAO, E.; WANG, Q.; PENG, L.; JIN, W.; WANG, H. Effects of repeated freezing and thawing on myofibrillar protein and quality characteristics of marinated Enshi black pork. Food Chemistry, v. 378, p. 131994, 2022. Disponível em: https://doi.org/10.1016/j.foodchem.2021.131994. Acesso em: 9 nov. 2025.
LIMA, R. A. S.; CINTRA, A. G. Revisão do Estudo do Complexo do Agronegócio do Cavalo. Brasília: ESALQ/USP/FAJ, 2016.
LIMA, R. A. S.; SHIROTA, R.; BARROS, G. S. C. Estudo do complexo do agronegócio cavalo. Piracicaba: CEPEA/ESALQ/USP, 2006.
MEDEIROS, A.S.L.; GOMES, G.M.; CARMO, M.T.; PAPA, F.O.; ALVARENGA, M.A. Cryopreservation of stallion semen using different amides. Theriogenology, v.58, p.273-276, 2002. Disponível em: https://doi.org/10.1016/S0093-691X(02)00898-1. Acesso em: 10 nov. 2025.
MEDRANO, A.; HOLT, W.V.; WATSON, P.F. Controlled freezing studies on boar sperm cryopreservation. Andrologia, v.41, p.246-250, 2009. Disponível em: https://doi.org/10.1111/j.1439-0272.2009.00927.x. Acesso em: 10 nov. 2025.
MORADI, M.; HAJARIAN, H.; KARAMISHABANKAREH, H.; SOLTANI, L.; SOLEYMANI, B. Pre-treatment of ram semen extender with magnetic nanoparticles on freeze-thawed spermatozoa. Veterinary Medicine and Science, [S.l.], v. 8, n. 2, p. 792–798, 2022. Disponível em: https://doi.org/10.1002/vms3.689. Acesso em: 9 nov. 2025.
OLIVEIRA, G. C.; OLIVEIRA, B. M. M.; CELEGHINI, E. C. C.; FERNANDES, C. B.; MATTOS, C. B. Criopreservação do sêmen equino: uma revisão. Revista Brasileira de Reprodução Animal, v. 37, n. 1, p. 23–28, 2013.
PARKS, J. E.; GRAHAM, J. K. Effects of cryopreservation procedures on sperm membranes. Theriogenology, v. 38, p. 209–222, 1992. Disponível em: https://doi.org/10.1016/0093-691X(92)90231-F. Acesso em: 9 nov. 2025.
PEÑA ALFARO, C. E.; MONTEIRO, R. A. .; BARROS, L. de O. .; MORAIS, V. de A. INSEMINAÇÃO ARTIFICIAL E TECNOLOGIA DE SÊMEN EM JUMENTOS. Ciência Animal, [S. l.], v. 31, n. 1, p. 01–13, 2021. Disponível em: https://revistas.uece.br/index.php/cienciaanimal/article/view/9542. Acesso em: 8 nov. 2025.
PORTO, M. E. G. Alterações de propriedades biológicas e físico-químicas da água induzidas por campo magnético. 112 f. Dissertação (Mestrado em Química) – Instituto de Química, Universidade Estadual de Campinas, Campinas, 1998.
SANTOS, M. I. Sonicação e centrifugação na criopreservação de sêmen equino. 2020. 49 f. Dissertação (Mestrado em Medicina Veterinária) – Programa de Pós-Graduação em Veterinária, Faculdade de Veterinária, Universidade Federal de Pelotas, Pelotas, 2020.
SHARAFI, M.; BORGHEI-RAD, S. M.; HEZAVEHEI, M.; SHAHVERDI, A.; BENSON, J. D. Cryopreservation of Semen in Domestic Animals: A Review of Current Challenges, Applications, and Prospective Strategies. Animals, Basel, v. 12, n. 23, p. 3271, 2022. Disponível em: https://doi.org/10.3390/ani12233271. Acesso em: 9 nov. 2025.
SILVA, L. T. da; MAIA, M. da S.; AQUINO, J. J. M. de; MOURA, C. E. B. de. Comparação morfológica da célula espermática equina no sêmen fresco e refrigerado. In: SANTANA, O. A.; CABRAL FILHO, P. E.; RODRIGUES, C. G. (org.). Anais do Encontro Anual da Biofísica 2017. São Paulo: Blucher, 2017. p. 22–25. Disponível em: https://doi.org/10.5151/biofisica2017-008. Acesso em: 9 nov. 2025.
SOUZA, E. Inseminação artificial. Revista de Veterinária e Zootecnia, [S.l.], v. 2, p. 92-96, 1912.
SOUZA, G. V. de; SILVA, A. R. A. H. S.; BARRETO, M. A. P.; SILVA, V. H. A. H. S.; SHIMODA, E.; SILVA, J. F. S. Variações das características seminais entre garanhões Mangalarga Marchador submetidos a quatro curvas de congelamento e duas de descongelamento. REVISTA FOCO, [S. l.], v. 18, n. 4, p. e8000, 2025. Disponível em: https://doi.org/10.54751/revistafoco.v18n4-009. Acesso em: 10 nov. 2025.
SQUIRES, E. L. et al. Cooled and frozen stallion semen, fort collins: animal reproduction biotechnology laboratory. Colorado State University, Bulletin, n. 9, 1999.
TAI, C. Y.; WU, C. K.; CHANG, M. C. Effects of magnetic field on the crystallization of CaCO₃ using permanent magnets. Chemical Engineering Science, v. 63, p. 5606–5612, 2008. Disponível em: https://doi.org/10.1016/j.ces.2008.08.004. Acesso em: 9 nov. 2025.
TANG, J.Y.; ZHANG, H.Y.; TIAN, C.Q.; SHAO, S.Q. Effects of different magnetic fields on the freezing parameters of cherry. Journal of Food Engineering, v. 278, p. 109949, 2020. Disponível em: https://doi.org/10.1016/j.jfoodeng.2020.109949. Acesso em: 9 nov. 2025.
TOLEDO, E. J. L.; RAMALHO, T. C.; MAGRIOTIS, Z. M. Influence of magnetic field on physical–chemical properties of liquid water: insights from experimental and theoretical models. Journal of Molecular Structure, v. 888, n. 1–3, p. 409–415, 2008. Disponível em: https://doi.org/10.1016/j.molstruc.2008.01.010. Acesso em: 9 nov. 2025.
TOTA, M.; JONDERKO, L.; WITEK, J.; NOVICKIJ, V.; KULBACKA, J. Cellular and molecular effects of magnetic fields. International Journal of Molecular Sciences, v. 25, n. 16, p. 8973, 2024. Disponível em: https://doi.org/10.3390/ijms25168973. Acesso em: 9 nov. 2025.
VIDAMENT, M.; DUPERE, A. M.; JULIENNE, P.; EVIAN, A.; NOUE, P.; PALMER, E. Equine frozen semen: Freezability and fertility field results. Theriogenology, v. 48, p. 907–917, 1997. Disponível em: https://doi.org/10.1016/S0093-691X(97)00319-1. Acesso em: 9 nov. 2025.
WATSON, P. F. The causes of reduced fertility with cryopreserved semen. Animal Reproduction Science, [S.l.], v. 60, n. 4, p. 481–492, 2000. Disponível em: https://doi.org/10.1016/S0378-4320(00)00099-3. Acesso em: 9 nov. 2025.
WOO, M. W.; MUJUMDAR, A. S. Effects of Electric and Magnetic Field on Freezing and Possible Relevance in Freeze Drying. Drying Technology, v. 28, n. 4, p. 433–443, 2010. Disponível em: http://dx.doi.org/10.1080/07373930903202077. Acesso em: 9 nov. 2025.
YE, P.; LUO, K.; FENG, A.; ZHAO, D.; WANG, D.; LIN, X.; LIU, Z. Magnetic field improves the quality of frozen tilapia fillets by decreasing the ice crystals during freezing process. International Journal of Food Science and Technology, v. 59, n. 12, p. 8961–8971, dez. 2024. Disponível em: https://doi.org/10.1111/ijfs.17357. Acesso em: 9 nov. 2025.
ZHANG, X.; YAREMA, K.; XU, A. Biological effects of static magnetic fields. Berlin/Heidelberg: Springer, 2017. p. 1–220.
ZHOU, Q.; QIN, B.; HUANG, H. Research on the formation mechanism of magnetized water used to wet coal dust based on experiment and simulation investigation on its molecular structures. Powder Technology, v. 391, p. 69–76, 2021. Disponível em: https://doi.org/10.1016/j.powtec.2021.05.092. Acesso em: 9 nov. 2025.
ZHOU, Z.; ZHAO, H.; HAN, J. Supercooling and crystallization of water under DC magnetic fields. Journal of Atomic and Molecular Physics, v. 4, p. 1405–1408, 2012. DOI: 10.3969/j.issn.0438-1157.2012.05.012.





































